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cobas® MTB-RIF/INH

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Prueba de resistencia rápida para un tratamiento adecuado

La tuberculosis es una infección bacteriana causada por especies del complejo Mycobacterium tuberculosis (TB, MTB). Una cepa resistente al fármaco se define como la resistencia a, por lo menos, un fármaco primario utilizado para tratar la tuberculosis. Una TB multirresistente (TB-MDR) se define como la resistencia al menos a isoniazida y rifampicina, los dos fármacos contra la TB más eficaces. Una TB muy farmacorresistente (TB-XDR) se define como una cepa de MDR-TB con resistencia adicional a cualquier fluoroquinolona y al menos un fármaco contra la TB inyectable de segunda línea (p. ej., amikacina, kanamicina, capreomicina). En 2017, se estimó que el >5% de los casos nuevos de TB en el mundo presentaban TB-MDR/RR. La frecuencia de la TB-MDR varía según la región y es mayor entre los pacientes tratados previamente.

 

 

La prueba cobas® MTB-RIF/INH para su uso en los sistemas cobas® 6800/8800 es una prueba de PCR cualitativa automatizada en tiempo real diseñada como una prueba refleja junto con el cobas® MTB para detectar mutaciones asociadas a la resistencia a la rifampicina del gen rpoB y mutaciones asociadas a la resistencia a la isoniazida en los genes katG y inhA genes de la M. tuberculosis. La prueba está indicada para su uso en muestras de frotis de bacilos acidorresistentes (AFB) positivas o negativas, esputo sin tratar y esputo digerido y descontaminado (tratado con N-acetil-L-cisteína/NaOH) y lavado broncoalveolar (LBA), que dieron positivo para el complejo M. tuberculosis con la prueba cobas® MTB. La detección de ADN complejo de MTB de tipo natural sirve como control interno para supervisar toda la preparación de las muestras y el proceso de amplificación por PCR. Además, la prueba utiliza un control positivo y un control negativo de título bajo.

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Algoritmo de diagnóstico molecular

El uso de un diagnóstico completo es fundamental para garantizar que se inicia el tratamiento adecuado. Cuando el paciente presenta síntomas de tuberculosis se realiza la prueba cobas® MTB. Si es positiva, se debe evaluar la resistencia farmacológica del paciente utilizando la prueba cobas® MTB-RIF/INH. Si es negativa, puede utilizarse la prueba cobas® MAI para detectar una infección no tuberculosa.

Algoritmo de diagnóstico molecular
Uso previsto

La prueba cobas® MTB-RIF/INH para su uso en los sistemas cobas® 6800/8800 es una prueba diagnóstica cualitativa automatizada in vitro, que utiliza la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en tiempo real, para la detección directa de mutaciones asociadas a la resistencia a la rifampicina del gen rpoB y mutaciones asociadas a la resistencia a la isoniazida en los genes katG e inhA del Mycobacterium tuberculosis en micobacterias respiratorias humanas. La prueba está indicada para su uso en muestras de frotis de bacilos acidorresistentes (AFB) positivas o negativas, esputo sin tratar y esputo digerido y descontaminado (tratado con N-acetil-L-cisteína/NaOH) y lavado broncoalveolar (LBA), que dieron positivo para el complejo M. tuberculosis con la prueba cobas® MTB. Esta prueba está indicada para su uso junto con cultivo y pruebas de sensibilidad a fármacos, y como prueba refleja junto con la prueba cobas® MTB, como ayuda en el diagnóstico de infección por M. tuberculosis multirresistente (MDR-TB).

Información para pedidos

 Número de material

 Nombre del producto

 Pruebas por unidad

 07833326190

 cobas® MTB-RIF/INH

 72 cassettes de prueba

 07833342190

 Kit de control positivo cobas® MTB-RIF/INH

 16 controles x 1 ml cada uno

 07002238190

 Kit de control negativo de tampón cobas® 6800/8800

 16 controles x 1 ml cada uno

 08185476001

 Solución de inactivación microbiana cobas®

 16 frascos de 30 ml cada uno

Estado de registro

CE-IVD, no aprobada en los EE. UU.

Instrucciones de uso

Accede a los prospectos a través del sitio web de Roche Diagnostics de tu país.

Referencias bibliográficas

 

  1. Global tuberculosis report 2018. Geneva: World Health Organization; 2018. Licence: CC BY-NC-SA 3.0 IGO.

Especificaciones y rendimiento analítico

  • Volumen de muestra

    Esputo ≥0,4 ml, Sedimento ≥0,2 ml

  • Tipos de muestras

    Esputo sin tratar, sedimento de esputo, lavado broncoalveolar (LBA)

  • Selección de los pacientes

    Si se ha recogido suficiente muestra del paciente, la prueba cobas® MTB-RIF/INH puede realizarse junto con las pruebas cobas® MTB y cobas® MAI sin la duplicación del procesamiento preanalítico

     

  • Procesamiento de muestras

    Licuación e inactivación manuales seguidas de sonicación y amplificación y detección automatizadas en los sistemas cobas® 6800/8800

  • Regiones diana de PCR

    Se detectan dieciocho mutaciones asociadas a la resistencia a la rifampicina (gen rpoB) y siete mutaciones asociadas a la resistencia a la isoniazida (gen katG y región promotora del gen inhA) mediante múltiples cebadores y sondas específicas de mutaciones.

     

  • Controles

    El control interno garantiza la validez de la muestra. El control positivo y el control negativo del tampón específicos de la prueba garantizan la validez del análisis.

  • Inclusividad

    Mutaciones del gen rpoB asociadas a la resistencia a la rifampicina:

    L511P, Q513K, Q513L, Q513P, D516V, D516Y, S522L, S522Q, H526D, H526L, H526N, H526R, H526Y, S531L, S531W, L533P

     

    Mutaciones del gen katGs y mutaciones de la región del promotor del gen inhA asociadas a la resistencia a isoniazida:

    Gen katG: S315I, S315N, S315T, S315T2

    Región del promotor del gen inhA: T-8A, T-8C, C-15T

     

    La inclusividad de dos mutaciones más del gen rpoB asociadas a la resistencia a la rifampicina (S522W y D516G) se verificó mediante el análisis de plásmidos

  • Especificidad analítica

    Un panel de 145 bacterias, hongos y virus, incluidos los que se encuentran comúnmente en las vías respiratorias, no interfirió con la prueba generando resultados falsos positivos

     

  • Sensibilidad analítica (límite de detección)

    M. tuberculosis resistente a RIF
        94,0 UFC/ml (esputo/sedimento de LBA)
        182 UFC/ml (esputo sin tratar)
    M. tuberculosis resistente a INH
        12,6 UFC/ml (esputo/sedimento de LBA)
        27,5 UFC/ml (esputo sin tratar)

  • Interferencia endógena

    No se ve afectado por la presencia de niveles elevados de jugo gástrico, hemoglobina, sangre entera humana, ADN humano, mucina, pus y saliva

  • Interferencia exógena

    No se ve afectado por la presencia de 48 fármacos y sustancias de venta sin receta

Rendimiento clínico

Sensibilidad y especificidad de MTB-RIF-INH

Heterorresistencia

 

La capacidad de detectar MTB mutante en una infección mixta con MTB de tipo natural se confirmó mediante el análisis de diferentes cocientes entre MTB mutante y de tipo natural. La prueba cobas® MTB-RIF/INH detecta niveles bajos de concentración del aislado de cultivo de MDR MTB (~3 x LD) en un fondo de hasta un 60% de MTB de tipo natural en muestras de esputo y sedimento.

Sistemas cobas® 6800 y cobas® 8800

 

Los sistemas totalmente automatizados cobas® 6800/8800 ofrecen el tiempo de obtención de los resultados más rápido con el mayor volumen de pruebas y el mayor tiempo de autonomía operativa posibles entre las plataformas moleculares automatizadas disponibles en el mercado, lo que permite a los laboratorios mejorar la eficacia operativa y les confiere flexibilidad para adaptarse a las demandas analíticas cambiantes.

 

Los reactivos listos para usar cargados se almacenan a las temperaturas adecuadas en el sistema, con su validez controlada. Esto permite que el menú completo de micobacterias que incluye cobas® MTB, cobas® MAI y cobas® MTB-RIF/INH se ejecute a la perfección con el menú disponible (VIH, hepatitis, VPH e ITS) para obtener resultados de calidad que ayuden a acelerar el tratamiento adecuado y reducir la propagación de la infección.