Les tests PCR multiplex sont effectués simultanément sur le même échantillon ce qui engendre un débit plus élevé pour un temps de traitement moins important et donc une meilleure rentabilité globale.
Les tests PCR multiplex permettent de :
À première vue, le multiplexage se veut un choix logique. L'exécution de plusieurs analyses sur un même échantillon est la solution diagnostique la plus efficace et elle permet aux laboratoires d'économiser du temps et de l'argent. Mais la réponse est plus complexe.
La PCR multiplex peut présenter des défis d'optimisation. Premièrement, certaines combinaisons de tests ne peuvent pas être effectuées ensemble sans compromettre les performances et la précision. Chaque paire d'amorces et chaque sonde est conçue pour amplifier et détecter une cible unique. Plus le nombre d'amorces dans une même réaction est élevé, plus vous avez de chances d’obtenir une amplification hors cible. Effectuer plusieurs tests dans un même puits peut également entraîner des réactions d'amplification PCR contradictoires qui peuvent se traduire par des faux négatifs.
C'est la raison pour laquelle il est nécessaire d’optimiser les tests au préalable. Les laboratoires doivent également comparer les conditions de multiplexage à chaque réaction individuelle, pour vérifier la performance. La vérification comprend l'évaluation et l'optimisation des amorces et des sondes, des additifs et des conditions de cycle. Cela permet d'identifier la bonne combinaison de conditions et d'ingrédients qui permet d'obtenir des résultats aussi justes qu'en analyse singleplex. Ce processus peut toutefois être long et coûteux.
Comment les laboratoires peuvent-ils améliorer leurs résultats et leur efficacité opérationnelle ? La réponse se trouve dans un mélange réactionnel optimisé.
Un mélange réactionnel multiplex est une solution pratique, prête à l'emploi, qui comprend des concentrations préoptimisées, des polymérases, des dNTP et des additifs qui permettent de soutenir l'amplification et l'identification de plusieurs cibles d'acides nucléiques.
Dans l’idéal, étant donné que les réactions sont souvent préparées à température ambiante, le mélange réactionnel doit contenir des enzymes thermostables.
Un mélange réactionnel multiplex est testé et optimisé à plusieurs reprises par le fournisseur, de manière à garantir que les réactions multiplex ont une spécificité et une sensibilité comparables aux tests singleplex correspondants. Le mélange doit permettre de détecter facilement les cibles à partir d'un large éventail d'échantillons.
L'utilisation d'un mélange réactionnel multiplex peut réduire les coûts de laboratoire :
Les tests multiplex peuvent permettre de rationaliser le flux de travail et de simplifier la manipulation, pour une meilleure efficacité et un meilleur contrôle des coûts. L'utilisation de mélanges réactionnels multiplex optimisés offre une précision, une sensibilité et une spécificité comparables à celles des tests réalisés en singleplex et réduit au minimum les processus fastidieux d'optimisation des tests. Cela peut aider les laboratoires à améliorer leur efficacité opérationnelle, à réduire les coûts globaux et à améliorer leurs perspectives économiques.
