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La PCR de cerca

Elevación de los resultados de PCR

En el entorno sanitario actual en el que los costes importan, los resultados coherentes y fiables son fundamentales para el éxito del laboratorio.

 

A pesar de ser relativamente sencillas, las pruebas PCR no son inmunes al error: los fallos pueden dar lugar a una sensibilidad o especificidad deficientes. Cada paso del  proceso de PCR debe controlarse y evaluarse rigurosamente, calculando y  aplicando correctamente temperaturas precisas de desnaturalización e hibridación durante el ciclo para determinar las concentraciones adecuadas de cebador y sonda para los objetivos deseados y más.1


Dado el alto grado de precisión necesario para mantener procesos de laboratorio sólidos, la optimización es fundamental para obtener resultados fiables. Los laboratorios que invierten tiempo y recursos en una configuración de PCR adecuada tienen más probabilidades de lograr resultados fiables, reproducibles y sólidos con mayor especificidad y sensibilidad.

Mantenimiento de la integridad de los resultados

 

Los resultados precisos y fiables producen mejores resultados en todos los ámbitos, desde la investigación médica hasta el diagnóstico y la atención al paciente. Para garantizar resultados de alta calidad se requiere precisión en todo momento. Es necesario tener en cuenta la recogida, el transporte, la clasificación y preparación, el almacenamiento y los procedimientos de control de calidad de las muestras.

 

La calidad y pureza de las muestras es un factor clave. Las muestras de baja calidad y la contaminación a menudo ponen en peligro el resultado final, lo que obliga a los laboratorios a gastar en valiosos recursos para corregir errores, que puede incluir impartir nueva formación para el personal clínico (médicos, enfermeros, etc.) y de laboratorio. Los fallos pueden requerir tiempo y ser costosos. Sin embargo, con un riguroso control de calidad y resolución de problemas, puede producir siempre resultados de alta exactitud.

 

Para mantener la integridad de los resultados y producir datos significativos y fiables a escala, existen ciertas comprobaciones de rendimiento que deben tener lugar.

 

primer plano de mano con guante blanco sujetando una muestra
icono de control de calidad animado

Realiza el control de calidad durante la recogida, el transporte y la preparación.2

Utiliza el etiquetado correcto y códigos de barras legibles al clasificar las muestras.

icono de código de barras animado
icono de ADN animado

Asegúrate de que el ADN/ARN son de la más alta calidad, los reactivos están bien formulados y los cebadores y sondas están correctamente diseñados.

Evita la contaminación minimizando las tareas manuales con automatización integral.

Icono de sistemas analíticos animados

La tecnología actual hace posible abordar estos desafíos y mejorar significativamente la calidad de los resultados de PCR. La combinación de los analizadores  totalmente automatizados y de alto volumen de Roche con soluciones  pre y post analíticas permite crear un flujo de trabajo totalmente automatizado que ofrece más protección frente a errores costosos y una eficiencia y velocidad inigualables.

Aprende más sobre la PCR y cómo las soluciones de Roche influyen en el área de diagnóstico

Referencias bibliográficas

  1. Primer Digital. General Guidelines for PCR Optimization. https://primerdigital.com/pcr.html. Fecha de acceso: 12 de noviembre de 2020.

  2. Labome. Assay Development: 5 Considerations and 8 Fundamentals. https://www.labome.com/method/How-to-Develop-Assays-5-Considerations-and-8-Fundamentals.html. Fecha de acceso: 12 de noviembre de 2020.

Componentes clave para optimizar la PCR

 

Cuando se trata de la optimización de PCR, los cebadores, las sondas y el nivel de automatización son de vital importancia.1

 

Selección de los cebadores y sondas adecuados

 

Los diseños de cebadores y sondas tienen una influencia significativa en el éxito de los análisis de PCR,1 y son fundamentales para una cuantificación fiable y precisa.

 

Los cebadores y las sondas deben ser de la calidad y pureza adecuadas para cumplir los criterios necesarios para la optimización. La detección de dianas específicas requiere cebadores y sondas bien diseñados para garantizar que las secuencias no diana relacionadas no comprometan los resultados.

 

Roche ha innovado y desarrollado continuamente nuestro diseño de ensayo para lograr una alta sensibilidad y especificidad con el fin de obtener los mejores resultados de PCR.

 

                           

Realmente, la clave es tener el diseño correcto de cebador y sonda con la calidad adecuada de manera que puedas ampliarla para fabricar en las cantidades necesarias.



Matthias Hoppler
Director sénior, Desarrollo de ensayos - Diagnóstico molecular     

                              
El experto de Roche Matthias Hoppler analiza el papel de los reactivos en la optimización del rendimiento de la PCR.

El compromiso de Roche con el avance de la PCR



Desde la inversión inicial en PCR a principios de la década de 1990 hasta la actualidad, Roche ha estado a la vanguardia del progreso de la PCR. Conoce las innovaciones de Roche que definen la industria  y descubre nuestra visión para el futuro de esta potente tecnología.

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Referencias bibliográficas

  1. Wadle S, Lehnert M, Rubenwolf S, Zengerle R, von Stetten F. Real-time PCR probe optimization using design of experiments approach. Biomol Detect Quantif. 2015;7:1-8.