Desde finales de la década de 1980, Roche se ha comprometido con y ha invertido en el desarrollo y la mejora de la tecnología de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). Después de adquirir los derechos a la PCR en 1991, los científicos de Roche han seguido mejorando el proceso de la PCR, convirtiéndolo en una herramienta estándar de todas las ciencias biológicas.
En 1991, el mismo año que Roche adquirió los derechos a la PCR, se desarrolla la PCR con transcripción inversa (RT-PCR) utilizando una enzima individual que resiste el calor y puede crear una cadena de ADN a partir del ARN, facilitando las pruebas diagnósticas de virus ARN. Esto es útil para identificar, estudiar y comprender mejor los retrovirus, infecciones como el VIH, que tienen ARN en lugar de ADN en sus genomas.
La RT-PCR se completa en dos pasos: la reacción de transcripción inversa (RT) seguida por la amplificación de la PCR.
Paso 1: Utilizando transcriptasa inversa en un tubo con una muestra de ARN, el ARN se transcribe de forma inversa en una cadena de ADN “complementario” (ADNc). Esto empareja los nucleótidos de ARN con sus correspondientes nucleótidos de ADN, creando una secuencia de ADN.
Paso 2: Utilizando el ADNc, el proceso de la PCR de tres pasos copia el ADN durante múltiples ciclos de amplificación del ADN. A partir de ahí, el ADN puede usarse en pruebas diagnósticas y de monitorización.
En 2003, Roche presentó el analizador COBAS® TaqMan® que respaldaba tres pruebas de IVD COBAS® TaqMan®; el virus de la inmunodeficiencia humana-1 (VIH-1), el virus de la hepatitis B (VHB) y el virus de la hepatitis C (VHC) en Europa. Estas fueron las primeras pruebas de PCR que permitieron que la amplificación y la detección se produjesen al mismo tiempo. El proceso se denominó PCR en tiempo real.
Utilizando sondas fluorescentes, el ADN producido en la reacción de amplificación por PCR se puede monitorizar en tiempo real para detectar la presencia del virus patógeno. Como el ADN patógeno amplificado se acumula en cada ciclo de PCR, los segmentos de ADN amplificado se “iluminan”, permitiendo una detección cualitativa del virus. Debido a que la PCR y la detección se pueden llevar a cabo ahora simultáneamente, no secuencialmente, disminuye el tiempo hasta el resultado y la interacción humana con las muestras se reduce, reduciendo el riesgo de contaminación.
En 2007, Roche lanzó COBAS® AmpliPrep/COBAS® TaqMan®, el primer sistema de PCR en tiempo real totalmente automatizado. El sistema, compuesto de dos instrumentos, uno que completa la preparación de la muestra y otro que realiza el proceso de PCR y la detección del ADN del patógeno en tiempo real. Este avance reduce adicionalmente el tiempo necesario hasta la detección y el diagnóstico y disminuye el riesgo de contaminación de la muestra que se está analizando.
Con un compromiso continuo con la calidad y la innovación, Roche seguirá invirtiendo, investigando y mejorando la tecnología de PCR.
