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リアルタイムPCR検査とは

Coronavirus

DNAの増幅をリアルタイムに観察する、それがリアルタイムPCRです 

 

従来のPCRではDNAを増幅させた後、電気泳動などで増幅産物を確認します。この方法は手間がかかったり、何サイクル反応させたら十分に増幅されているのか分からなかったりと、遺伝子検査に用いるのにはいくつかの課題があります。

そこで開発されたのがリアルタイムPCRです。
名前の通り、DNAの増幅をリアルタイムに観察する方法です。

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リアルタイムPCR法のひとつであるTaqMan PCRでは、TaqManプローブと呼ばれる蛍光物質で標識した短いDNA断片を使用します。このプローブはDNAが合成される時に加水分解され、その際の蛍光を測定することで、DNA合成反応の進捗をリアルタイムに観察できるのです

リアルタイムPCRは定性だけでなく、定量もできる技術です。

DNA合成が1回行われると1つのTaqManプローブが加水分解されます。2回なら2つ、4回なら4つと、DNA合成の回数だけ蛍光エネルギーが観察でき、蛍光カメラでその強度を測定すれば、DNA増幅がどれだけ起こったのかが推測可能です。逆算すれば増やす前のDNAが、どのくらい存在していたのかも分かります。増幅後の反応プレートを開封することなく、手間をかけずに定性・定量のどちらも測定できるリアルタイムPCRは、様々な検査の分野で活躍しています。

PCR グラフ

遺伝子検査が分かるミニハンドブック
―PCR技術と精度管理編―

はこちらからダウンロードいただけます。

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リアルタイムPCR検査

現在感染している患者さんのSARS-CoV-2を高感度で検出する

 

cobas® SARS-CoV-2検査は、患者の鼻咽頭および咽頭スワブサンプル中のSARS-CoV-2の定性検出を目的としたリアルタイムRT-PCR検査です。

この検査は、ロシュの全自動cobas®  5800/6800/8800システム上で使用することができます。この検査は日本国内においても IVD「体外診断用医薬品」として承認を受けています。
（製造販売承認番号：30200EZX00020000）


また、研究用試薬としてcobas® z480やLightCycler® 480,LightCycler® 96などで動作するLightMix Modular SARS-CoV (COVID19)試薬も販売しています。

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PCRって何ですか？

実は、「PCR」は新型コロナウイルスが発見される前から、様々な場面で活用されているのです。PCR技術の先駆者であり、臨床診断への応用に貢献してきたロシュが、PCRについてご説明します。

関連情報

ポリメラーゼ連鎖反応（PCR）技術のパイオニアとして、ロシュは科学的および臨床的な改善を続けています。ロシュのシステムとアッセイは、血漿・血液スクリーニングおよびウイルス定量検査から、HPV一次スクリーニングに対する近年の世界的な普及化、cobas® EGFR変異キット v2.0を使用した腫瘍学的検査の進歩まで、多岐に渡る臨床試験において選択されています。ロシュは製品のパフォーマンス・スタンダードを常に保つよう努力しており、お客様に納得のいく結果を提供したいと考えています。
PCRは、数時間でDNAのある領域を数百万倍にまで増幅するために用いられ、この技術により臨床医は最小量の検体で疾患を診断したり、モニタリングしたりすることができます。
PCR法は遺伝子検査のグローバルスタンダードとして世界に認知され、多くの医療関係者に幅広くご支持をいただいている技術です。これまでは迅速な診断が不可能とされてきた、 ウイルス、細菌に起因する感染症も、PCR技術を臨床に応用することで、より早く、より簡便に診断することが可能となります。
1980年代後半から、ロシュはポリメラーゼ連鎖反応（PCR）技術の開発と改善に専心し、投資をしてきました。1991年にPCRの権利を取得した後、ロシュの科学者はPCRの工程を改善し続け、すべての生物学科学にわたる標準的ツールにしました。
1991年に、ロシュはCetusからPCRの権利を買い、疾患を発見する遺伝子検査で使用するためにこの技術の開発に投資を行いました。ロシュ遺伝子検査はPCRを診断に有用なツールとして開発しただけでなく、この技術の先駆者であり続けています。
ロシュは、ライセンシングプログラムを通して、PCR特許ポートフォリオへのアクセスを全世界で利用可能にしています。ロシュは、ヒトまたは動物の診断検査のためのPCR製品を作る権利を企業に提供し、PCRベースのヒトまたは動物診断検査を実施する許可も検査室に与えています。
ポリメラーゼ連鎖反応（PCR）が1983年に生まれて以来、 ロシュはPCRに投資して開発を行い、探求してきました。
医療業界全体と同様、検査室は医療コスト削減のためにより大きなプレッシャーに直面しており、より少ないリソースでより多くの業務を可能にするクリエイティブなソリューションを必要としています。プロセスの最適化は、検査室のスループット改善および運営コスト低減に役立ちます。
DNAの増幅をリアルタイムに観察できる。 それがリアルタイムPCR（Taqman PCR)です。 従来のPCRではDNAを増幅させた後、電気泳動などで増幅産物を確認します。この方法は手間がかかったり、何サイクル反応させたら十分に増幅されているのか分からなかったりと、遺伝子検査に用いるのにはいくつかの課題があります。そこで開発されたのがリアルタイムPCR（Taqman PCR）です。名前の通り、DNAの増幅をリアルタイムに観察する方法です。
ポリメラーゼ連鎖反応（PCR）は、20世紀における最も重要な科学的進歩の1つとして知られており1、たった1本のオリジナルの鎖から無限のDNAコピーを迅速かつ容易に作り出す方法です。ごく少量のDNAは、数十分～数時間の間に増幅され、配列決定や感染症の特定など、色々な検査に応用されます。PCR検査は、診断検査以外にも、食品の安全性、法医学、疫学、その他多くの分野で活用されています。
抗原定性検査はいつ実施されるべき? 抗原定性検査は、症状のある患者では通常、感染の早期段階でウイルス量が最も高い場合に、最もすぐれた効果を発揮します。迅速かつ反復的な検査により、ウイルスの伝播を抑制し感染症に対する免疫の弱い人を保護することができるため、抗原定性検査は学校や介護施設などの密集した環境で特に有用です
SARS-CoV-2のモニタリングには、ポリメラーゼ連鎖反応（PCR）検査、抗原検査、抗体検査（RUO）など、いくつかの種類の検査が使用されます。これらの検査は目的が異なるため、どの検査がどのような状況に適しているかを理解することが重要です。
新型コロナウイルスに代表される感染症の検査にはポリメラーゼ連鎖反応(PCR)と呼ばれるものがあります。PCR法は、ごく少量の遺伝子を増幅し、数百万から数十億のコピーを作成することで、検出・分析に必要な量を確保するもので、高感度に病原体を検出できることが特徴となります。
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    関連製品

    肝炎項目のモニタリング、血液スクリーニング、微生物検査、ウィメンズヘルスなどのハイスループットアプリケーション向けに設計されたコバス 6800システムは、8時間のシフトで最大384件の検査を実行でき、24時間で1,536件の検査を実行できます。
    8時間シフトで最大960件の検査、24時間で4,032件の検査を実行でき、1ランあたりわずか3回のユーザーインターラクションと最大4時間のウォークアウェイが可能です。
    8時間あたり最大144テスト、最大15試薬項目の架設を可能にしたこのシステムは、 1日に20～150検体を処理するラボにとって理想的なソリューションです。
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      関連試薬

      コバスSARS-CoV-2 はIVD(体外診断用医薬品)の承認を受けたコバス6800/8800用のSARS-CoV-2検査試薬です。SARS-CoV-2特異的なOrf1a/b遺伝子とサルベコウイルス亜属に共通したE遺伝子を同時に測定します。核酸抽出から増幅・測定まで完全に自動化されており、オペレータのリスク低減と大量検知の処理を両立させる検査試薬・システムとなっています。
      コバス Liat SARS-CoV-2＆Flu A/Bは、鼻腔や鼻咽頭スワブ検体からSARS-CoV-2、A型インフルエンザウイルス、B型インフルエンザウイルスの検出を僅か20分で行うことができる、コバスLiatシステム専用のマルチプレックスPCR検査試薬です。
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